scientific-metabolomics

name	scientific-metabolomics
description	メタボロミクス解析スキル。Pareto スケーリング、PLS-DA + VIP スコア、置換検定（Q²）、 代謝パスウェイ濃縮解析（Fisher exact test）、代謝物相関ネットワーク、 Volcano プロット/箱ひげ図による差次代謝物同定パイプライン。 Scientific Skills Exp-07 で確立したパターン。
tu_tools	[{"key":"hmdb","name":"HMDB","description":"ヒトメタボロームデータベース"},{"key":"metabolomics_workbench","name":"Metabolomics Workbench","description":"Metabolomics Workbench REST API メタボロームデータ・RefMet"}]

Scientific Metabolomics Analysis

LC-MS / GC-MS / NMR ベースのメタボロミクスデータを対象に、品質管理→前処理→ 単変量解析→多変量解析→パスウェイ解析の標準パイプラインを提供する。 メタボロミクス固有の統計手法（PLS-DA、VIP スコア）に特化している。

When to Use

• メタボロミクスデータの統計解析パイプラインが必要なとき
• PLS-DA による群間判別＋VIP スコアによるバイオマーカー候補を算出するとき
• 代謝パスウェイ濃縮解析が必要なとき
• Pareto スケーリングや代謝物相関ネットワークが必要なとき

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Quick Start

1. メタボロミクス前処理

import numpy as np
import pandas as pd
from sklearn.impute import KNNImputer

def metabolomics_preprocessing(df, sample_col="Sample_ID", group_col="Group",
                                 min_detect_pct=0.5):
    """
    メタボロミクス標準前処理パイプライン。
    1. 低検出率代謝物の除去
    2. KNN 欠損値補完
    3. log2 変換
    4. Pareto スケーリング
    """
    metabolite_cols = [c for c in df.columns if c not in [sample_col, group_col]]

    # Step 1: 低検出率フィルタリング
    detect_rate = df[metabolite_cols].notna().mean()
    keep = detect_rate[detect_rate >= min_detect_pct].index.tolist()
    removed = len(metabolite_cols) - len(keep)
    print(f"  Removed {removed} metabolites with <{min_detect_pct*100:.0f}% detection rate")
    metabolite_cols = keep

    # Step 2: KNN 補完
    imputer = KNNImputer(n_neighbors=5)
    df[metabolite_cols] = imputer.fit_transform(df[metabolite_cols])

    # Step 3: log2 変換
    df[metabolite_cols] = np.log2(df[metabolite_cols].clip(lower=1e-10) + 1)

    # Step 4: Pareto スケーリング
    for col in metabolite_cols:
        mean = df[col].mean()
        std = df[col].std()
        df[col] = (df[col] - mean) / np.sqrt(std + 1e-10)

    return df, metabolite_cols

2. 単変量解析 — 差次代謝物同定

from scipy.stats import mannwhitneyu, ttest_ind
from statsmodels.stats.multitest import multipletests

def univariate_analysis(df, metabolite_cols, group_col, group1, group2,
                         test="mannwhitneyu", correction="fdr_bh"):
    """
    2 群間の差次代謝物を同定する。

    Returns:
        DataFrame with columns: metabolite, log2FC, pvalue, padj, significant
    """
    g1 = df[df[group_col] == group1]
    g2 = df[df[group_col] == group2]

    results = []
    for met in metabolite_cols:
        v1 = g1[met].dropna()
        v2 = g2[met].dropna()

        if test == "mannwhitneyu":
            stat, pval = mannwhitneyu(v1, v2, alternative="two-sided")
        else:
            stat, pval = ttest_ind(v1, v2)

        log2fc = v2.mean() - v1.mean()
        results.append({"metabolite": met, "log2FC": log2fc, "pvalue": pval})

    results_df = pd.DataFrame(results)

    # 多重検定補正
    reject, padj, _, _ = multipletests(results_df["pvalue"], method=correction)
    results_df["padj"] = padj
    results_df["significant"] = reject
    results_df["neg_log10p"] = -np.log10(results_df["pvalue"] + 1e-300)

    results_df = results_df.sort_values("pvalue")
    return results_df

3. PLS-DA + VIP スコア

from sklearn.cross_decomposition import PLSRegression
from sklearn.preprocessing import LabelEncoder

def plsda_analysis(X, y, n_components=2):
    """
    PLS-DA を実行し、VIP スコアを算出する。

    VIP (Variable Importance in Projection):
        VIP_j = sqrt(p * Σ(q²_a * w²_ja) / Σ(q²_a))
        VIP > 1 の変数がバイオマーカー候補

    Parameters:
        X: 代謝物データ行列 (n_samples, n_metabolites)
        y: グループラベル

    Returns:
        pls_model, scores, vip_scores
    """
    le = LabelEncoder()
    y_encoded = le.fit_transform(y).astype(float)

    pls = PLSRegression(n_components=n_components, scale=True)
    pls.fit(X, y_encoded)

    # スコア（潜在変数）
    scores = pls.transform(X)

    # VIP スコア算出
    T = pls.x_scores_       # (n, n_comp)
    W = pls.x_weights_      # (p, n_comp)
    Q = pls.y_loadings_     # (1, n_comp)

    p = X.shape[1]
    vip = np.zeros(p)

    ss_total = np.sum(Q**2 * np.sum(T**2, axis=0))
    for j in range(p):
        ss_j = np.sum(Q**2 * np.sum(T**2, axis=0) * W[j, :]**2)
        vip[j] = np.sqrt(p * ss_j / ss_total)

    return pls, scores, vip


def plot_plsda_scores(scores, y, group_names=None, figsize=(8, 6)):
    """PLS-DA スコアプロットを描画する。"""
    import matplotlib.pyplot  plt

    fig, ax = plt.subplots(figsize=figsize)
    unique = np.unique(y)
    colors = plt.cm.Set1(np.linspace(, , (unique)))

     color, group  (colors, unique):
        mask = y == group
        label = group_names[group]  group_names  (group)
        ax.scatter(scores[mask, ], scores[mask, ],
                  c=[color], label=label, s=, alpha=, edgecolors=)
        
         matplotlib.patches  Ellipse
        cov = np.cov(scores[mask, ], scores[mask, ])
        vals, vecs = np.linalg.eigh(cov)
        angle = np.degrees(np.arctan2(vecs[, ], vecs[, ]))
        w, h =  * np.sqrt(vals * )  
        ell = Ellipse(xy=(scores[mask, ].mean(), scores[mask, ].mean()),
                     width=w, height=h, angle=angle,
                     fill=, color=color, linewidth=, linestyle=)
        ax.add_patch(ell)

    ax.set_xlabel()
    ax.set_ylabel()
    ax.set_title(, fontweight=)
    ax.legend()
    plt.tight_layout()
    plt.savefig(, dpi=, bbox_inches=)
    plt.close()

4. 置換検定（PLS-DA バリデーション）

def permutation_test_plsda(X, y, n_components=2, n_permutations=100):
    """
    PLS-DA モデルの置換検定。
    Q² と R²Y の分布を生成し、真のモデルの有意性を評価する。
    """
    from sklearn.model_selection import cross_val_predict
    le = LabelEncoder()
    y_enc = le.fit_transform(y).astype(float)

    # 真のモデル
    pls_true = PLSRegression(n_components=n_components, scale=True)
    y_pred = cross_val_predict(pls_true, X, y_enc, cv=5)
    ss_res = np.sum((y_enc - y_pred.ravel())**2)
    ss_tot = np.sum((y_enc - y_enc.mean())**2)
    q2_true = 1 - ss_res / ss_tot

    # 置換
    q2_perm = []
    for _ in range(n_permutations):
        y_perm = np.random.permutation(y_enc)
        pls_p = PLSRegression(n_components=n_components, scale=True)
        y_pred_p = cross_val_predict(pls_p, X, y_perm, cv=5)
        ss_res_p = np.sum((y_perm - y_pred_p.ravel())**2)
        ss_tot_p = np.sum((y_perm - y_perm.mean())**2)
        q2_perm.append(1 - ss_res_p / ss_tot_p)

    p_value = np.mean(np.array(q2_perm) >= q2_true)

    return {
        "Q2_true": q2_true,
        "Q2_perm_mean": np.mean(q2_perm),
        "Q2_perm_std": np.std(q2_perm),
        "p_value": p_value,
        "significant": p_value < 0.05,
    }

5. 代謝パスウェイ濃縮解析

from scipy.stats import fisher_exact

def pathway_enrichment(significant_metabolites, pathway_annotations,
                        metabolite_col="Metabolite", pathway_col="Pathway",
                        total_metabolites=None):
    """
    Fisher 正確検定による代謝パスウェイ濃縮解析。

    Parameters:
        significant_metabolites: list of significant metabolite names
        pathway_annotations: DataFrame with metabolite-pathway mapping
        total_metabolites: 解析対象の全代謝物数
    """
    sig_set = set(significant_metabolites)
    all_annotated = set(pathway_annotations[metabolite_col])
    if total_metabolites is None:
        total_metabolites = len(all_annotated)

    pathways = pathway_annotations[pathway_col].unique()
    results = []

    for pw in pathways:
        pw_members = set(
            pathway_annotations[pathway_annotations[pathway_col] == pw][metabolite_col]
        )
        k = len(sig_set & pw_members)       # hit
        K = len(pw_members)                  # pathway size
        n = len(sig_set)                     # significant
        N = total_metabolites                # total

        # 2x2 分割表
        table = [[k, K - k], [n - k, N - K - n + k]]
        odds_ratio, p_value = fisher_exact(table, alternative="greater")

        results.append({
            "Pathway": pw,
            "Hits": k,
            "Pathway_Size": K,
            "Significant_Total": n,
            "Odds_Ratio": odds_ratio,
            "p_value": p_value,
        })

    results_df = pd.DataFrame(results).sort_values("p_value")
    _, padj, _, _ = multipletests(results_df[], method=)
    results_df[] = padj

    results_df.to_csv(, index=)
     results_df

6. 代謝物相関ネットワーク

def metabolite_correlation_network(df, metabolite_cols, method="spearman",
                                     threshold=0.7):
    """
    代謝物間の相関からネットワークを構築する。

    Parameters:
        threshold: |r| ≥ threshold のペアのみエッジとして採用
    """
    import networkx as nx

    corr = df[metabolite_cols].corr(method=method)

    G = nx.Graph()
    for i, met_i in enumerate(metabolite_cols):
        G.add_node(met_i)
        for j, met_j in enumerate(metabolite_cols):
            if i < j:
                r = corr.iloc[i, j]
                if abs(r) >= threshold:
                    G.add_edge(met_i, met_j, weight=abs(r),
                              sign="positive" if r > 0 else "negative")

    return G, corr

References

Output Files

ファイル	形式
results/univariate_results.csv	CSV
results/vip_scores.csv	CSV
results/pathway_enrichment.csv	CSV
figures/plsda_scores.png	PNG
figures/vip_barplot.png	PNG
figures/metabolite_network.png	PNG

利用可能ツール

ToolUniverse SMCP 経由で利用可能な外部ツール。

カテゴリ	主要ツール	用途
HMDB	HMDB_search	代謝物検索
HMDB	HMDB_get_metabolite	代謝物詳細取得
HMDB	HMDB_get_diseases	代謝物-疾患関連
KEGG	kegg_get_pathway_info	代謝パスウェイ情報
MetaCyc	MetaCyc_search_pathways	代謝経路検索
MetabolomicsWB	MetabolomicsWorkbench_search_compound_by_name	代謝物データベース検索

参照実験

• Exp-07: PLS-DA + VIP、Pareto スケーリング、パスウェイ濃縮、相関ネットワーク